1.标本采集:同时采集上呼吸道(包括鼻咽和口咽)和下呼吸道(包括痰、气管抽吸物或支气管肺泡灌洗液)标本,通过RT-PCR进行nCoV检测。在容易获得下呼吸道样本的情况下:使用适当的 PPE 进行样本采集(注意用于飞沫和接触预防的 URT 样本,以及用于防止空气的 LRT 样本) 采集 URT 样本时,使用病毒采样棉签(无菌聚酯或人造丝)而不是棉花)和病毒运输介质。不要从鼻孔或扁桃体取样。对于疑似nCoV患者,尤其是肺炎或重症患者,单次URT样本不能排除诊断,建议增加URT和LRT样本。 LRT(相对于 URT)样本更可能呈阳性,并且如上所述,在容易获得下呼吸道样本的情况下(例如,机械通气患者),临床医生可能会选择仅收集下呼吸道样本)。</ >

2.核酸提取:核酸提取仪器或手工核酸提取

1),不用仪器,使用人工提取

核酸提取和样品分离所需的设备和实验室耗材

生物安全柜(功能:分离样品,提供人员、样品和环境保护),

台式高速冷冻离心机(功能:转速≥12000RPM,核酸分析等),

低温冰箱(功能:试剂储存),

金属浴,移液器(功能:精确加样),

灭菌离心管(作用:核酸分离等),

乳胶手套(功能:防污染),

无水乙醇、异丙醇、无 DNase 和 RNase 的水(未经 DEPC 处理的水)。

3.全自动核酸提取仪:(自动提取,26分钟一次可提取32个样本)

配套预装板直接加入样品,直接上机提取:

4.荧光定量PCR检测

所需设备和耗材:生物安全柜(功能:样品制备、人员提供、样品和环境保护),

荧光定量PCR仪(功能:PCR扩增检测分析),

台式高速冷冻离心机(功能:转速≥12000RPM),

低温冰箱(-86℃样品储存,-20℃和4℃试剂储存),

振荡器,(混合)

Graduated Pipette-tip(功能:精确加载),1-10ul规格

灭菌离心管(0.5/1.5/2ml),

0.2ml光学级PCR管/板(功能:PCR反应管),

乳胶手套(功能:防污染)。

核酸提取、反应体系配置、结果解读等以试剂盒说明为准。

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