正确地 冷冻冻存管 ,您应该遵循一些基本规则。首先,您不应将管子填充到最大填充容量。这是因为细胞在冷冻过程中需要一定的空间来膨胀。建议在试管最大刻度以下填充约 0.2 毫升。
冻存管
冷冻冷冻管使研究人员能够在极低的温度下保存样品。冷冻管,也称为 1 mL 冷冻管,用于在低至 -196 摄氏度的温度下储存样品。这些管子满足飞机运输的特定压力要求。为了便于存放,一些公司生产的管子在底部有一个凹口,这样更容易拿取。
生成的精子和卵子混合物用 10% DMSO 和 5% 牛血清白蛋白按 1:1 稀释。然后将冷冻管放在漂浮架上,并立即放入液氮中。冷冻后,样品可在水浴中解冻 6 ​​分钟,然后在 15 摄氏度下解冻 4 分钟。
冷冻管 EF6100 和 EF600-103 是两种类型的冷冻管,用于冷冻和解冻样品。两者具有相同的功能,但具有不同的冷却配置文件。 EF600-103 被编程为以 -1 摄氏度/分钟的线性速率冷却样品。一旦样品达到预编程的温度,样品将在 -80 摄氏度下保持 1 小时,然后转移到 -80 摄氏度的冰箱中。
可控速冻机
控速冷冻机是储存冷冻管或其他精密样品的完美选择。它们提供较宽的温度范围,最终温度为 -180 oC,可确保样品的完整性。它们可以手动操作或通过 PC 软件程序操作。
可控速率冷冻机包括三个主要组装部件:斯特林发动机冷端101、温度传感器位置和固定样品板。样品板由其下方的一组磁铁固定到位。样品板一次可用于多个实验,样品板也可容纳微量滴定板。
聚合酶链反应
要冷冻冷冻管,您需要先准备它们。通过添加 10% DMSO、30% FBS 和 60% 介质来准备冷冻保存介质。然后,将此溶液中的细胞在 -20degC 下冷冻数月。请务必使用 Mr Frosty 冰箱,因为任何其他类型的容器都会降低其生存能力并降低其冷冻速度。一旦细胞被冷冻,用它们的 hPSC 线、细胞类型和通道数标记它们。
然后,冻结体积为 50 mL 的管子。每个试管中至少应有 1 x 104 个细胞。这个体积将允许您在没有任何液氮的情况下冷冻样品。
微管冷却器
冷冻微管是保存生物样本的有效方法。这些容器有编号的网格,可以识别样品,还有一个转子可以最大限度地减少冷凝。这些容器有 5 孔和 9 孔两种尺寸可供选择,它们可以反复用于冷冻和解冻生物样品。
根据液体的类型,一些管子冻结并迅速膨胀,而另一些则缓慢膨胀。建议缓慢冷冻以保存样品和试管材料。液体的温度和管材上的应力会影响冷冻动力学。正确处理管子可以最大限度地降低破裂的风险。

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